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2024-08-08 15:34:39

用于可持续生物制造的渗透性强的聚合物二氧化硅混合装甲细胞催化剂

导读 全细胞催化是绿色生物制造的几项核心技术之一,可分为活细胞催化、静止细胞催化和灭活细胞催化。其中,灭活细胞催化具有成本低、产物纯化简...

全细胞催化是绿色生物制造的几项核心技术之一,可分为活细胞催化、静止细胞催化和灭活细胞催化。其中,灭活细胞催化具有成本低、产物纯化简单等优点。然而,灭活细胞中酶的不稳定性及泄漏限制了灭活细胞催化的实际应用。在灭活细胞表面构建装甲是一种可行有效的增强酶稳定性、抑制酶泄漏的策略。二氧化硅装甲(SA)具有成本低、结构可控、符合食品安全要求等特点,在细胞固定化生产高附加值化学品方面具有巨大潜力。然而,较厚的SA具有较高的强度和较低的渗透性,而较薄的SA则相反。因此,对具有渗透性和坚固性的细胞催化剂的SA的需求很高。

天津大学科研团队利用聚乙烯亚胺(PEI)诱导正硅酸乙酯(TEOS)和3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)水解缩合,在细胞表面构建了一种聚合物-二氧化硅杂化装甲(PSHA)。由于PEI具有支链结构,它有助于在无序的SA中产生纳米孔,从而增强渗透性。同时,PEI与SA之间的氢键(N···H或O···H)和静电相互作用(NH 3 +与O -)等多种相互作用可以增强装甲的机械强度。

研究团队对PSHA、细胞、cell@SA和cell@PSHA的渗透性和机械强度进行了测试。cell @PSHA的比表面积分别是细胞的5.93倍和cell@SA的1.92倍;cell@PSHA的总孔容分别是细胞的3.82倍和cell@SA的1.45倍,MD在PSHA中的扩散速率高于SA,PSHA的渗透性优于SA。此外,cell@PSHA的杨氏模量高达2.69±1.28 GPa,而细胞和cell@SA的杨氏模量分别为0.42±0.08 GPa和0.86±0.26 GPa。相比之下,PSHA具有更高的机械强度。

该团队测试了PEI在PSHA中的作用,随着PEI浓度的提高,MD通过PSHA的扩散速率进一步增强;随着PEI浓度的提高,cell@PSHA的半衰期明显延长,用0.75 g L -1 PEI制备的cell@PSHA的半衰期为94.95 h,而用0.05 g L -1 PEI制备的cell@PSHA的半衰期仅为34.49 h;PSHA的渗透性和机械强度得到进一步增强,证明了PEI在PSHA中的重要性。

研究团队对cell@PSHA在塔格糖生产中的应用进行了测试, cell@PSHA的活性高于cell@SA,这可能归因于PSHA优异的渗透性和良好的生物相容性。与cell和cell@SA相比,cell@PSHA的热稳定性得到了显著提高,半衰期分别延长了216.18%和175.38%。

此外还对cell@PSHA的工业应用潜力进行了评估, cell@PSHA可催化15个连续反应,反应时间长达969 h,而cell@SA可催化7个连续反应,表明cell@PSHA的重复使用效果优于cell@SA;在15批反应中,cell@PSHA的塔格糖产量均高于60 g L -1,平均产量可达77.76 g L -1。

团队成员包括来自中国天津大学的程怡然、吴振华、张博宇、张家旭、石家福、蒋忠义。

该研究得到国家重点研发计划(批准号:2021YFC2102300)、国家自然科学基金(批准号:22122809)、天津市合成生物技术创新能力提升项目(批准号:TSBICIP-KJGG-003)、生物化工工程国家重点实验室开放课题(批准号:2020KF-06)、海河化学可持续转化实验室、高校学科人才引进计划(批准号:BP0618007)等资助。